水質葉綠素a分光光度法的采集保存和測定

        我國測定葉綠素a的方法主要有分光光度法和熒光分光光度法，環境保護部發布的《HJ 897-2017 水質 葉綠素a的測定 分光光度法》、水利部頒布的“水質葉綠素的濃度測分光光度法(SL88-1994現已廢止被SL88-2012代替)及海洋監測規范第7部分：近海污染生態調查和生物監測GB17378.7-2007。其中SL88-1994與《水和廢水監測分析方法》(第四版增補版)中“葉綠素a的測定方法”在樣品處理和計算公式都相同，屬干丙酮研磨萃取法。而SL88-2012與GB17378.7-2007在樣品處理和計算公式相同，屬于丙酮反復凍融-浸提法。

我們的采用了熒光檢測技術，該技術是利用浮游植物體內的葉綠素受特定波長的光激發后產生的熒光與其濃度在一定范圍內呈線性關系的原理,因此通過檢測浮游植物中葉綠素a發出的熒光強度即可實現對浮游植物的定量測定。

水質葉綠素a分光光度法的采集、保存和測定
1、樣品采集：樣品的采集一般使用有機玻璃采水器或其他適當的采樣器采集水面下0.5m樣品，湖泊、水庫根據需要可進行分層采樣或混合采樣，采樣體積為1L或500ml。如果樣品中含沉降性固體( 如泥沙等), 應將樣品搖勻后倒入2L量筒，避光靜置30min,取水面下5cm樣品，轉移至采樣瓶。在每升樣品中加入1ml碳酸鎂懸濁液， 以防止酸化引起色素溶解。
注:如果水深不足0.5m.在水深1/2處采集樣品，但不得混入水面漂浮物。
2、樣品保存：樣品采集后應在0C~4C避光保存、運輸，24h內運送至檢測實驗室過濾(若樣品24h內不能送達檢測實驗室，應現場過濾，濾膜避光冷凍運輸)，樣品濾膜于-20C避光保存，14d內分析完畢。
注:樣品采集后，如條件允許，宜盡快分析完畢。
3、樣品測定：將一定量樣品用濾膜過濾截留藻類，研磨破碎藻類細胞，用丙酮提取葉綠素，離心后于特定波長下測定提取液吸光度，根據公式計算水中葉綠素a濃度。